Если ваши хроматографические задачи допускают использование многоразовых стеклянных колонок, то вы должны быть уверены, что каждый раз наполняете их правильно. Здесь я объясняю процесс набивки колонки сухим методом и подробно рассказываю о том, как уравновесить колонку, набитую сухим методом. Я даже добавил рисунок, чтобы помочь вам визуализировать процесс, и чтобы во время чтения вы сами не высохли от скуки.

У нас с женой есть привычка сохранять и повторно использовать пластиковые пакеты как пакеты для мусора или продуктовые пакеты. Мы стараемся сохранить старые стаканчики от йогурта и контейнеры от мороженого и использовать их для хранения и т. д. Мы стараемся использовать пластиковые бутылки и крышки для садоводства и художественных работ. Думаю, суть понятна: повторное использование полезно и для кошелька, и для окружающей среды.

Количество пластика, которое мы применяем в лаборатории и для хроматографии, также ошеломляюще. Нередко использование одноразовых предметов необходимо для получения безупречного результата без влияния загрязняющих факторов. Но в некоторых случаях можно совершить покупку, которая поможет сэкономить деньги и защитить окружающую среду.

Например, самостоятельная набивка стеклянных хроматографических колонок является разумным и экономичным решением для некоторых достаточно грубых методов очистки. Вам нужно рассчитать, сколько времени вы затратите на повторное наполнение. Существует также риск того, что колонка не будет набита профессионально, и поэтому может снизиться эффективность разделения и воспроизводимость. Но если вы решите набить колонку самостоятельно, я помогу вам.

Есть два способа наполнения стеклянной колонки: сухой или мокрый. В этом сообщении блога я хотел бы объяснить вам, как сделать сухую набивку, чтобы вы могли получить наилучшие результаты в вашей хроматографической системе.

Набивка сухим методом с использованием сжатого газа — это быстрый и простой процесс, но плотность сорбента при этом невысока. Поэтому этот метод больше подходит для силикагеля с частицами среднего и большого размера (25-200 мкм). Если вы работаете с более мелкими частицами, вы должны вместо этого использовать суспензию силикагеля в растворителе и заполнять стеклянную колонку с помощью насоса. Я объясню вам процесс мокрого наполнения в одном из следующих постов.

Независимо от того, выберете ли вы сухую или мокрую набивку, весь процесс можно разделить на три этапа:

1. Подготовка
2. Заполнение
3. Уплотнение

Для упаковки колонки сухим методом вам понадобятся следующие материалы:

• разделительная колонка
• емкость для заполнения
• силикагель
• баллон с азотом
• воронка

На этапе подготовки необходимо промыть колонку до полного стекания и дать ей полностью высохнуть. На этапе заполнения необходимо установить колонку вертикально и навинтить на нее емкость для заполнения. Затем с помощью воронки неплотно насыпьте силикагель. Емкость для наполнения должна быть заполнена силикагелем до такой степени, чтобы сверху оставалось не менее 10% объема колонки.

Важно отметить, что вы никогда не должны постукивать по колонке или вызывать какие-либо вибрации, поскольку это приведет к неизбежному разделению частиц и сделает колонку бесполезной.

На этапе уплотнения азот из баллона подается через колонну до тех пор, пока не исчезнет шипение. Затем вам следует закрыть главный клапан баллона с азотом и полностью сбросить давление. Эта процедура очень важна для предотвращения разрыва слоя колонки при отсоединении шланга, подающего азот.

Теперь колонка готова к уравновешиванию.

Как уравновесить колонку, набитую сухим способом?

Уравновешивание надо проводить непосредственно с растворителем, требуемым для разделения. Я бы рекомендовал слить первые 100-200 мл жидкости из только что заполненной колонки и только потом проводить прокачку растворителя. Эта мера предосторожности предотвращает попадание вымытых мелких частиц силикагеля в насос. Как только воздух перестанет выходить из колонки, и базовая линия детектора станет стабильной, можно приступать к разделению.

Для получения дополнительной информации об обслуживании, заполнении, загрузке и хранении колонки ознакомьтесь в нашем or Энциклопедии по хроматографии Chromapedia.

Я думаю, этого вам хватит. Если вы захотите еще что-нибудь почитать в ожидании следующей публикации, ознакомьтесь в предыдущих материалах блога с тем, какие еще существуют варианты стационарной фазы, кроме силикагеля. Надеюсь, этот пост был не слишком сухим для вас, но даже если и так, оставайтесь с нами: следующий хроматографический пост, безусловно, будет более влажным.

До новых встреч,