Mükemmel pikler için sadece hayal kurmanıza gerek yok, aksine bunu başarabilirsiniz! Şimdi sizlere kromatogramınızda karşınıza çıkabilecek birkaç hoş olmayan pik tiplerinden bahsedeceğim. Piklerin öne eğilimi veya tam ayrılmayan pikler gibi can sıkıcı bir kaç sorundan kurtulup mükemmel şekilli piklere sahip olabilmek için okumaya devam edin.

Eşim geçetiğimiz gece soğuk terler içinde uyandı, neredeyse çığlıklar içerisinde kafası patlayacaktı. Zavallı korkunç bir rüya görmüştü. Sadece kemikten oluşan bir tavuğun arka bahçede koştırduğunu görmüşü. Kendi kabusumu anlatmaya çalışarak onu sakinleştirmeye çalıştım. Ama bunu,

Kendi kemikli tavuğu kadar korkunç bulmadı.

Sanırım gürültülü pikler sadece bir kromatografi kabusu. Ancak siz de bu görüntüyü benim kadar rahatsız edici buluyorsanız size bu konu ile alakalı yardım edebilirim. Kromatografide en korkulu senaryolardan bir tanesi piklerin ayrılmaması ve öne eğilimidir ( fronting ). Bu yazıda bu sorunlardan bahsedeceğim.

Hadi ilk olarak kromatografide yaşanan öne eğilim ( fronting )’den bahsedelim.

Öne eğilim kuyruklanma etkisinden daha nadir olarak yaşanır ancak yaşandığı zaman böyle bir görüntü ortaya çıkar

Piklerin öne eğilmesinin bir nedeni kolonun aşırı yüklenmesidir.

Her bir kolonun maksimum bir ayrıştırma kapasitesi vardır ve bu kapasitenin üzerine çıkıldığında sabit faz ve durgun fazda gerçekleşmesi gereken ayrım gerçekleşmez. Bu sebepten ötürü maddeler kolonda tutunamaz, süzülür ve kolondan hızlı bir şekilde dışarı çıkar. Öne eğilimi azaltmak için kartuşa yüklediğimiz madde miktarını düşürebiliriz.

Bir diğer sebep ise numunenin çözüldüğü solvent ile mobil fazın uyumsuzluğudur. Bu durumda numuneyi, mobil fazda kullanılan solventte çözmeyi deneyebilirsiniz. Bunun için bir diğer çözüm ise katı yüklemedir. Katı yükleme uygulamalarında numunenin herhangi bir solventte çözülmesi gerekmemektedir. Daha detaylı ürün yükleme teknikleri hakkında bilgi için Büchi Chromapedia rehberini inceleyiniz.

Piklerin öne eğilimini inceledik. Şimdi bir diğer kabusumuza geçebiliriz; piklerin ayrışmaması. Piklerin ayrışmaması yaşandığında kromatogram üzerinde böyle bir görüntü ortaya çıkar.

Karşımıza piklerin ayrışmadığı bir senaryo çıktığında ilk kontrol etmeniz gereken ayrılmama sadece tek bir pik üzerinde mi yoksa aldığınız yüm piklerde mi gerçekleşiyordur.

Sadece tek bir pik üzerinde gerçekleşiyorsa, büyük ihtimalle piklerin ayrılmaması kimyasal bir problemdir. Bunun en belirgin çözümü mobil faz koşullarını değiştirmektir. Eğer bu durum piklerin ayrışmaması ile alakalı size yardımcı olmuyorsa ayrışmayı daha iyi hale getirmek için farklı bir durgun faz seçimi yapılabilir.

Tüm piklerde gerçekleşiyorsa, bu durumda ayrışmama kolondan dolayı gerçekleşmektedir. Örnek olarak kolon içerisinde boşluk kalması veya kanallanması buna sebebiyet verebilir. Eğer hazır kartuş kullanıyorsanız en doğrusu yenisine geçmektir. Ayrıca uygun kartuş seçiminizi gözden geçirmek için doğru bir zaman olabilir.

Alternatif olarak, kısmen tıkanmış fritli kartuşlar da bu yaşanan olaylara sebebiyet verebilir. Bu sorunun ortadan kalkması için numunenizi sisteme yüklemeden önce filtreleme gerçekleştirebilirsiniz. Aynı zamanda daha önce de bahsettiğim gibi katı yükleme yapabilirsiniz.

Umarım bu yazı yaşayabileceğiniz piklerin öne eğilimi veya ayrışmaması ile alakalı sizlere bir miktar da olsa yardımcı olabilir. Sizler de bu sayede kromatografide yaşayabileceğiniz kabusların önüne geçersiniz.

Kromatgorafi ile alakalı başka problemler mi yaşıyorsunuz? Lütfen aşağıya yorum bırakın böylece size yardımcı olabilirim.

Görüşmek üzere,