Кто не любит хорошую грязевую ванну! Представьте ваше ощущение, когда вы падаете на колени на морское дно во время отлива или наблюдаете, как дети прыгают в лужи и снова вылезают из грязи! Мне нравятся глинистые суспензии, но я также люблю их, когда дело касается хроматографии. В этом посте я расскажу о процессе упаковки стеклянных колонок суспензионным методом и сравню этот подход с методом сухого заполнения.

Хорошо, когда в жизни есть возможность выбора, иногда подходит один вариант, а иногда – другой. Как я уже писал ранее, мне вряд ли захочется нести 10 кг фруктов и овощей в бумажном пакете (но тканевая сумка в этом случае вполне подойдет). Мороженое легче и чище есть из креманки ложкой, но рожки мороженого наверняка очень вкусны, особенно, когда у вас есть только одна свободная рука. И я могу выбрать для себя живописный маршрут, чтобы насладиться поездкой куда-нибудь. Но в других случаях мне очень хочется добраться побыстрее, поэтому я еду по шоссе.

Я думаю, вы меня поняли. Выбор — это всегда хорошо! И в лаборатории то же самое. В некоторых случаях разные методы могут привести к одинаковым желаемым результатам. И что еще лучше, обычно методы могут быть адаптированы, чтобы дать вам возможность выбрать тот, который лучше соответствует вашим потребностям.

В последнем посте по хроматографии мы обсуждали, как набить колонку сухим методом. Сегодня я хотел бы предоставить вам выбор. Вы можете заполнить колонку суспензионным методом! Напомню еще раз, самостоятельно набитые колонки обычно приводят к более низкому уровню эффективности разделения и худшей воспроизводимости, по сравнению с колонками с профессиональной набивкой. Но самостоятельно заполненные хроматографические колонки позволяют очищать простые смеси более экономичным способом.

Кстати, в настоящее время в большом количестве доступны разнообразные флэш-картриджи , которые редко подходят для самостоятельной набивки. Повторное использование полипропиленовых деталей имеет ограничения и вторично собранные картриджи не очень надежны.

Как правило, лучший выбор для самостоятельной набивки и перенабивки – стеклянные колонки.

Существует два способа повторного заполнения стеклянной колонки: сухой и суспензионный. Сухой способ быстр и прост. Он основан на использовании сжатого газа. При сухом заполнении плотность упаковки не слишком большая, поэтому метод лучше подходит для частиц силикагеля среднего и крупного размера (25-200 мкм).

Для более мелких частиц я бы рекомендовал использовать суспензию силикагеля в растворителе, которая с помощью насоса подается в стеклянную колонку.
Как работает суспензионный метод набивки стеклянной колонки?

Для начала вам необходимо подготовить следующее оборудование:

• разделительную колонку;
• емкость для заполнения суспензией;
• растворитель для суспензии;
• воронку;
• стакан.

Во-первых, вам надо промыть, очистить и высушить досуха колонку. Затем приготовить суспензию силикагеля в растворителе. Обычно используют соотношение 2-3 мл растворителя на 1 г силикагеля к. Ниже приведено еще несколько примеров:

Column ID x L (mm)	Silica gel (g)	Slurrying process (ml of solvent)
26 x 460	150	300 - 600
36 x 460	270	500 - 900
49 x 460	470	800 - 1200
70 x 460	1000	2000 - 2500

Затем вы устанавливаете колонку вертикально и накручиваете на нее емкость для заполнения суспензией. Теперь можно ввести суспензию в колонку из наполняющей емкости. Полностью заполните емкость растворителем, затем подсоедините входной штуцер колонки к насосу. С помощью насоса закачивайте в колонку 1-2 объема растворителя, пока силикагель не уплотнится, как следует.

Взгляните на изображение ниже, чтобы наглядно представить процесс:

Колонки, заполненные с использованием суспензионного метода, не требуют дополнительной стадии уравновешивания. Вы можете использовать такие колонки с вашей хроматографической системой сразу после того, как через сорбент будет пропущен 1-2 объема растворителя по отношению к вместимости колонки.